Hotstart Taq DNA聚合酶

Hotstart Taq DNA聚合酶

其他中文名稱 ： Hotstart Taq酶

英文名稱 ： Hotstart Taq DNA Polymerase

分子量 ： 94kDa，單體

級 別 ： BR

保 存 ： -20℃，保質期1年

純 度 ： ≥99%

濃 度 ： 5u/ul

活性定義 ： 在74℃、30分鐘內，使10nmol脫氧核糖核酸合成滲入多聚核苷酸（吸附在DE-81上）所需的酶量

酶活性分析混合物 ： 25mM TAPS(PH9.3,25℃), 50mM KC1, 2mM MgCL2, 0.2mM各種dATP,dGTP,dTTP, 0.1mM dCTP, 0.75mM活化的鮭魚精DNA和0.4MBq/ML(3H).-dTTP

保存緩沖液組分 ： 20mM Tris-HCL(PH9.0), 1mM DTT, 0.1mM EDTA,100mM KC1, 0.5%(V/V) Tween 20，0.5%(v/v) Nonidet P40和50%(v/v)甘油

10×Hot start PCR Buffer ： 200mM Tris-HCL(PH8.3,25℃), 200mM KC1, 50mM (NH4)2SO4

抑制劑 ： 陰離子去污劑（脫氧膽酸、肌氨酰和SDS的濃度分別高于0.06、0.02和0.01%時）

失活 ： 酚/氯仿抽提

質量控制 ： 相關測試表明無內切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染

功能啟動 ： 熱啟動PCR

性 狀 ： 液體。設計用于增強DNA擴增的特異性、敏感性和產量。使用該酶可在室溫配制反應體系，使用方便。它是一種化學修飾的重組Taq DNA Polymerase，蛋白分子氨基酸殘基上增加了熱不穩定的封閉基團。該酶在室溫下沒有活性，避免形成引物二聚體和非特異性延伸，從而增加DNA擴增的特異性。95℃加熱4分鐘可恢復活性。活化的酶具有與Taq DNA Polymerase相同的功能：催化5——3方向合成DNA，無可檢測的3——5校正外切酶活性，具有較低的5——3外切酶活性。該酶還具有脫氧核糖核酸酶轉移活性，在PCR產物的3-端多加11個腺嘌呤，活化前檢測不到這些活性。

用 途 ： 生化研究。高產量擴增復雜模板；PCR特異性高-降低錯配效應和減少引物二聚體的生成；增強的PCR敏感性；使用方便，室溫配制PCR反應體系；擴增產物具有3-dA突出末端；熱啟動PCR；高產量擴增長達3kb片段；RT-PCR；特異性擴增復雜cDNA和基因組模板；擴增低拷貝DNA模板；實時PCR；多重PCR；制備TA克隆用PCR產物