HuH-7人肝癌細胞培養方法

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HuH-7人肝癌細胞培養方法

實驗人員的無菌準備

1、肥皂洗手

2、穿好隔離衣，換好拖鞋

3、用75%的酒精棉球擦拭雙手

服務流程：

預約登記→辦理相關手續→復蘇細胞→細胞質量檢查→發送細胞（或自己來取細胞）→細胞售后技術咨詢答疑。

養方法如下：

1、從手術室無菌取腦髓灰質或白質后，仔細剝除腦膜、血管和纖維成分，置Hanks液中漂洗一、二次。

2、置于30—50倍體積的Hanks液中，此時腦組織比較柔軟，反復吹打即制成細胞懸液。

3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后，細胞或細胞團快自然下沉，脂肪等雜物易漂浮，可吸除上層、反復二、三次，即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細胞成分。

4、在沉降物中加入適量培養液，通過紗網成紗布過濾，計數并調整細胞密度。

5、接入培養瓶或皿中，置5%CO2溫箱中培養。

細胞培養無菌操作規范

1. 打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。

2. 進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待30min以上，以排盡臭氧。

3. 穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。

4. 風淋2分鐘。

5. 0.1%過氧乙酸水泡手，擦干。

6. 點燃酒精燈，超凈臺內應避免放入過多的物品，使用的吸管，滴管，試管，培養瓶等均事先滅菌。

7. 打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵，打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經火焰燒灼。

8. 水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。

9. 同一根吸管或滴管不應連續用于幾個不同的細胞系，吸取培養基的吸管應離開培養瓶或試管口0.5cm，避免伸入培養瓶口或試管口，以防止細胞系的互相混雜污染。

10. 漏在培養瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。

11. 操作完畢后恢復工作臺面。

售后規定：

1. 所有細胞免費售后期為一周，一周內細胞培養出現異常及時拍照反饋，超出一周沒有任何反饋視為細胞培養正常，后期若出現培養問題不再免費重發。

2. 售后僅針對由于細胞自身狀態問題導致不可傳代的情況，若客戶收貨一周內已經傳代或轉移細胞多次，出現死亡或者污染時不予免費售后，若客戶在我方未允許的情況下，擅自遺棄細胞，視為客戶自身問題導致細胞異常，不予免費售后。

3.凍存細胞發貨2管，客戶先復蘇一支，若復蘇失敗及時聯系我方并在我方指導下復蘇第二支，若客戶未反饋并復蘇2管失敗，我方將不提供免費售后服務，凍存細胞售后均發復蘇培養的，若要重發凍存細胞，需補加干冰運輸費用。

HuH-7人肝癌細胞培養方法公司本著客戶至上的原則，為客戶提供高質量高品質的產品，公司承諾如有任何質量的問題請打電話與我們工作人員聯系，免費包退換（非人為因素造成的）會給您一個滿意的答復。